多肽合成原理与步骤
多肽合成是一个重复添加氨基酸的过程,固相合成顺序一般从C端(羧基端)向N端(氨基端)合成。过去的多肽合成是在溶液中进行的称为液相合成法。
1.1多肽合成基本原理:
先将所要合成肽链的羟末端氨基酸的羟基以共价键的结构同一个不溶性的高分子树脂相连,然后以此结合在固相载体上的氨基酸作为氨基组份经过脱去氨基保护基并同过量的活化羧基组分反应,接长肽链。重复(缩合→洗涤→去保护→中和及洗涤→下一轮缩合)操作,达到所要合成的肽链长度,最后将肽链从树脂上裂解下来,经过纯化等处理,即得所要的多肽。其中α-氨基用BOC(叔丁氧羰基)保护的称为BOC固相合成法,α-氨基用FMOC(9-芴甲氧羰基)保护的称为FMOC固相合成法。
1.2固相多肽合成的步骤:
A,树脂的选择及氨基酸的固定
用于多肽合成的高分子的载体主要有3类:交联聚苯乙烯;聚酰胺:聚乙烯一乙二醇脂类树脂。氨基酸的固定主要是通过保护的氨基酸的羧基同树脂的反应基团之间形成共价键来实现。
B,氨基、羧基、侧链的保护及脱除
要成功合成具有特定的氨基酸顺序的多肽,需要对暂不参与形成酰胺键的氨基和羧基加以保护,同时对氨基酸侧链上的活性基团也要保护,反应完成后再将保护基团除去,近年来,FMOC合成法得到了广泛的应用。羧基通常用形成酯基的方法进行保护。甲酯和乙酯是逐步合成中保护羧基的常用方法。
C,成肽反应
固相中的成肽反应一般是将两个相应的氨基被保护的及羧基被保护的氨基酸放在溶液内并不形成肽键,要形成酰胺键,经常用的手段是将羧基活化,变成混合酸酐、活泼酯、酰氯或用强的缩合剂(如碳二亚氨)形成对称酸酐等方法来形成酰胺键。
D,裂解及合成肽链的纯化
BOC法用TFA+HF裂解和脱侧链保护基,FMOC法直接用TFA,有时根据条件不同,其它碱、光解、氟离子和氢解等脱保护方法也被采用。合成肽链进一步的精制、分离与纯化通常采用高效液相色谱、亲和层析、毛细管电泳等。
多肽合成范围
服务范围 | 普通线性肽,链长至189个氨基酸,毫克至克级,纯度可达99% |
简单修饰肽:免费提供N端乙酰化,末端酰胺化(Ac、Fmoc、Z、Bz等) | |
复杂修饰肽:荧光标记肽(FITC、Biotin、5-Fam、 罗丹明 CY系列等在肽的N端,肽链中间,C端修饰),磷酸化修饰肽(Thr(HPO3)、Tyr(HPO3)、Ser(HPO3) 等),环肽(酰胺环、二硫键环(分子间定位氧化)),多肽酯化修饰(Pal/Myr),甲基化多肽(Lys(Me)、Lys(Me)、Lys(Me)、Arg(Me)、同位素标记、磺基化多肽、,生物素标记肽(BIOTIN)、复合抗原肽(MAP)等 | |
不同多肽结构: 分支多肽 : 赖氨酸分支多肽 (Lys二分支多肽、Lys四分支多肽、Lys八分支多肽) 鸟氨酸分支多肽 (Orn二分支多肽、Orn四分支多肽、Orn八分支多肽) 环状多肽: 通过二硫键成环的多肽 单二硫键多肽,双二硫键多肽,三对二硫键多肽, 分子间对称二硫键多肽,分子间不对称二硫键多肽) 通过酰胺键成环的多肽 酰胺键首尾成环的多肽, 酰胺键侧链成环的多肽 | |
蛋白偶联:KLH,BSA,OVA | |
含特殊氨基酸肽:含有D型氨基酸及各种氨基酸衍生物 | |
不同纯度范围:粗肽、>70%、>80%、>90%、>95%、>98%、>99% |
文献多肽合成
本公司可根据客户提供的文献,合成相应结构的多肽产品。您只需提供含有多肽结构或者序列的文献即可。
若您需要对文献中的结构进行设计,我们技术人员和销售人员会根据您的需求,给一个可行的方案。若您觉得方案合理,我们将会根据已定方案来合成相应结构的多肽。具体详情,请联系我们的销售人员。