1.多肽合成服务

多肽合成原理与步骤

多肽合成是一个重复添加氨基酸的过程，固相合成顺序一般从C端（羧基端）向N端（氨基端）合成。过去的多肽合成是在溶液中进行的称为液相合成法。

1.1多肽合成基本原理：

先将所要合成肽链的羟末端氨基酸的羟基以共价键的结构同一个不溶性的高分子树脂相连，然后以此结合在固相载体上的氨基酸作为氨基组份经过脱去氨基保护基并同过量的活化羧基组分反应，接长肽链。重复（缩合→洗涤→去保护→中和及洗涤→下一轮缩合）操作，达到所要合成的肽链长度，最后将肽链从树脂上裂解下来，经过纯化等处理，即得所要的多肽。其中α-氨基用BOC（叔丁氧羰基）保护的称为BOC固相合成法，α-氨基用FMOC（9-芴甲氧羰基）保护的称为FMOC固相合成法。

1.2固相多肽合成的步骤：

A，树脂的选择及氨基酸的固定

用于多肽合成的高分子的载体主要有3类：交联聚苯乙烯；聚酰胺：聚乙烯一乙二醇脂类树脂。氨基酸的固定主要是通过保护的氨基酸的羧基同树脂的反应基团之间形成共价键来实现。

B，氨基、羧基、侧链的保护及脱除

要成功合成具有特定的氨基酸顺序的多肽，需要对暂不参与形成酰胺键的氨基和羧基加以保护，同时对氨基酸侧链上的活性基团也要保护，反应完成后再将保护基团除去，近年来，FMOC合成法得到了广泛的应用。羧基通常用形成酯基的方法进行保护。甲酯和乙酯是逐步合成中保护羧基的常用方法。

C，成肽反应

固相中的成肽反应一般是将两个相应的氨基被保护的及羧基被保护的氨基酸放在溶液内并不形成肽键，要形成酰胺键，经常用的手段是将羧基活化，变成混合酸酐、活泼酯、酰氯或用强的缩合剂（如碳二亚氨）形成对称酸酐等方法来形成酰胺键。

D，裂解及合成肽链的纯化

BOC法用TFA+HF裂解和脱侧链保护基，FMOC法直接用TFA，有时根据条件不同，其它碱、光解、氟离子和氢解等脱保护方法也被采用。合成肽链进一步的精制、分离与纯化通常采用高效液相色谱、亲和层析、毛细管电泳等。

多肽合成范围

文献多肽合成

本公司可根据客户提供的文献，合成相应结构的多肽产品。您只需提供含有多肽结构或者序列的文献即可。

若您需要对文献中的结构进行设计，我们技术人员和销售人员会根据您的需求，给一个可行的方案。若您觉得方案合理，我们将会根据已定方案来合成相应结构的多肽。具体详情，请联系我们的销售人员。

2.多肽修饰服务

多肽修饰介绍

多肽修饰种类繁多，可以简单划分为后修饰和过程修饰（利用衍生化的氨基酸修饰），常见的肽修饰包括：C末端修饰、N末端修饰、中间残基修饰，以及环化修饰。作为一种改变肽链主链结构或侧链基团的重要手段，多肽修饰可有效改变肽类化合物的理化性质、增加水溶性、延长体内作用时间、改变其生物分布状况、消除免疫原性、降低毒副作用等。

C端标记技术

C端酰胺化（Amidation,C-termainal）、醛基化（Aldehydes）、醇基化（Alcohols）、pNA (p-Nitroanilide)；

AMC、AFC、巯基乙胺化（Cysteamide）、酯基化（Ester）、N-烷基化（N-Alkyl Amides）等

N端标记技术

乙酰化Acetylated （Acetylated）、Palmytolyl、HYNIC、生物素标记（Biotinylated）、Br乙酰化（Bromoacetylated）；

螯合反应（DOTA，DTPA conjugated）、甲醛化（Formylated）、十四烷基、十八烷基化（Myristoylated）；

琥珀酰化、棕榈酸化、苹果酸化、脂肪酸化等（Succinylated）；

荧光标记修饰

C端修饰:AFC, AMC, Dap(Dnp), Lys(Dye), pNA, Rh110；

N端修饰:Biotin, Cy3, Cy5, Texas Red, 5-Tamra, 5-Fam，5-Fitc等；

Rhodamine 110 and Rhodamine B Luciferin, EDANS；

FAM, FITC, MCA, Rox, Sulforhodamine 101, 5-TAMRA；

环化反应

首尾成环，中间成环，特殊成环（N -> C or Head to Tail）；

2对二硫键，3对二硫键（Disulfide (S-S bond formation) .Trisulfide formation）；

天然产物活性肽成环（Cyclic-natural peptides ）；

甲基化修饰

侧链甲基化Lys(For),Lys(Me), Lys(Me)2, Lys(Me)3, Arg(Me)2 symmetrical, D-Tyr(Me),D-Tyr(Et)；

N端甲基化（N-Me-Arg,N-Me-Asp, N-Me-Glu, N-Me-Leu, N-Me-Nle, N-Me-Nva, N-Me-Phe, N-Me-S N- Me-Ser, N-Me-Trp, N-Me-Thr, N-Me-Val）；

磷酸化修饰

L型磷酸化修饰  

        Thr(H2PO3)、 pT 、苏氨酸磷酸化

        Tyr(H2PO3)、pY 、酪氨酸磷酸化

        Ser(H2PO3) 、pS、丝氨酸磷酸化

D型磷酸化修饰

        D-Thr(H2PO3)、p(D-T)  、D型苏氨酸磷酸化

        D-Tyr(H2PO3)、p(D-Y) 、D型酪氨酸磷酸化

        D-Ser(H2PO3) 、p(D-S)、D型丝氨酸磷酸化   

双磷酸化修饰：一个序列中有两个Thr，Tyr，Ser 位点进行磷酸化修饰。

多磷酸化修饰：一个序列中有多个Thr，Tyr，Ser 位点进行磷酸化修饰

聚乙二醇修饰（PEG修饰）

聚乙二醇修饰是指将PEG聚合物链共价连接到靶分子，通常是小分子化学药物或大生物分子如肽，蛋白质，碳水化合物，脂质，寡核苷酸，亲和配体，辅因子，脂质体和其他生物材料。而作为药物先导化合物的多肽分子在体内的应用受到一定程度的限制，主要体现在生物体肾小球的过滤作用、体内蛋白酶的水解破坏作用以及因多肽分子引起的体内抗原反应。将多肽用PEG修饰后（Pegylation），上述三方面的限制均大幅减小，从而提高了多肽在生物体内的应用。

常见的修饰基团：

氨基（-Amine）-NH2，氨甲基-CH2-NH2，马来酰亚胺-Mal，羧基-COOH,巯基（-Thiol）-SH，丙醛-ALD，琥珀酰亚胺碳酸酯-SC，琥珀酰亚胺乙酸酯-SCM，琥珀酰亚胺丙酸酯-SPA，琥珀酰亚胺琥珀酸酯-SS，琥珀酰亚胺-NHS，二硫吡啶基-OPSS，丙酸基-CH2CH2COOH，醛基-CHO，正吡啶二硫基-S-S-Pyridine，巯酯基-VS，丙烯酸基-Acrylate，丙烯酸基-AC，叠氮基-Azide，生物素基-Biotin，环氧基-EP，荧光素基-Fluorescein，戊二酸基-GA，酰肼基-Hydrazide，炔基-Alkyne，对硝基苯碳酸酯基-NPC，异氰酸基-NCO，邻二硫吡啶基-OPSS，硅烷基-Silane，-SVA，BOC-，羧甲基-CM，Fmoc-NH-。

同位素标记

稳定同位素标记多肽是指用稳定同位素标记的氨基酸合成的多肽。与标准氨基酸相比，同位素标记是指用2H，13C或15N代替原有的12C和14N原子。 重标氨基酸是非放射性的，只是分子量比标准氨基酸大一些。这种分子量的区别能够让其在蛋白定量分析和、蛋白结构分析和MS（或NMR）鉴定中成为有力的工具。可以实现肽类代谢途径研究，可以随时追踪含有稳定同位素标记肽在体内或体外的位置及其数量的运动变化情况，其高灵敏度、定位简单、定量准确等特点使得同位素修饰在医学及生物化学领域越来越得到广泛关注，稳定同位素标记多肽技术关键在于用于合成多肽的稳定同位素标记氨基酸的质量

订书肽合成技术

订书肽是基于多肽需形成α-螺旋通过细胞膜进入细胞的需求上发展起来的。生物体内的多种生命进程调节都是通过蛋白质与蛋白质之间的相互作用来实现的。例如病毒的自组装，细胞的生长，分裂，分化等过程。而通常蛋白-蛋白相互作用的界面太大，从而使小分子药物很难对其进行靶向定位，达到高效特异性地阻断这种相互作用，展现良好的治疗效果。蛋白类药物因为很难顺利通过细胞膜所以也达不到直接靶向细胞内相互作用的效果，因此，研究者们开始寻求一种能够克服这两种药物缺点的既能够进入细胞膜又能特异性靶向蛋白-蛋白相互作用的新的药物分子。

研究表明，具有α-螺旋结构和富含正电荷的多肽可以穿过细胞膜。因此，人们开发了利用二硫键与分子内酰胺键作为支架的α-螺旋结构，但是，这些支架在生理环境下均不能稳定存在。2000年，Verdine等发展了一种用碳碳键作为支架来稳定多肽α-螺旋结构的方法，由此方法得到的多肽成为订书肽(Stapled peptides)。订书肽有更高的α-螺旋程度，结合能力强，能通过细胞膜，难被蛋白酶水解，在生物体内半衰期长等优点。

(i, i+4)或者（i, i+7）类型原料分别是R8，R8H，S5，S5H

3.多肽检测服务

常规HPLC及MS

二级质谱测序

圆二色谱

MALDI-TOF

LC/MS

氨基酸测序

N元素分析

核磁